Mutacje w obrębie genu Rhodopsin u pacjentów z autosomalnym dominującym pigmentem siatkówki ad 5

Dwa lub trzy kolejne przeciągnięcia są nakładane. Podniesienie rogówki daje odchylenie w górę (szczytowa odpowiedź na rogówkę). Strzałki poziome wskazują czasy pośrednie pręta fali b (lewa kolumna) i czasy nieostrości b-stożka (prawa kolumna). Symbol kalibracji (prawy dolny róg) reprezentuje 50 msek w poziomie i 100 .V w pionie. Pacjenci z tymi mutacjami, którzy byli do tej pory badani, wykazywali różne nieprawidłowości w wywołanych światłem odpowiedziach elektrycznych, które są miarą pozostałej funkcji pręta i stożka (ryc. 3). Reakcje pręta na niebieskie światło były albo niewykrywalne, albo zmniejszone w amplitudzie z opóźnionym czasem ukrytym falą b. Reakcje stożka na białe migotanie światła mogą być nieznacznie zmniejszone w amplitudzie ze znacznymi opóźnieniami w czasie pośrednim (pacjent 1, Pro-347-Leu), niewykrywalne (pacjent 2, Pro-347-Ser) lub zmniejszone w amplitudzie z normalnymi czasami domniemanymi ( Pacjent 3, Thr-58-Arg). Pacjent 3 zachował znacznie więcej funkcji niż Pacjenci i 2, mimo że był starszy odpowiednio o 25 i 11 lat; jego połączone reakcje stożka i pręta na pojedyncze błyski białego światła, chociaż znacznie poniżej normy, były pięć razy większe niż u dwóch młodszych pacjentów.
Odmiany sekwencji nie są skorelowane z pigmentem siatkówki
Spośród 28 pacjentów, których sekwencje badano intensywnie, odkryliśmy dwie odmiany sekwencji w genie rodopsyny, które znajdowały się poza sekwencją kodującą genu i które nie korelowały z chorobą. Jednym z nich było przejście C-to-T występujące w czterech zasadach poniżej końca 3 egzonu 3. Mniej powszechne T w tej pozycji było obecne heterozygotycznie u dziewięciu pacjentów i homozygotycznie w jednym. Zmiana zasad wpływa na sekwencję rozpoznawaną przez restrykcyjną endonukleazę RsaI i prawdopodobnie pokrywa się z RFLP RsaI opisywanym przez innych.13 W następnej analizie znaleźliśmy normalnych osobników, którzy nosili T w tej pozycji albo heterozygotycznie, albo homozygotycznie; częstość występowania tego allelu wśród 39 zdrowych osób wynosiła 10 procent. Wnioskujemy zatem, że ta zmienność sekwencji w regionie nieulegającym translacji jest polimorfizmem niezwiązanym z barwnikiem siatkówki.
Drugim polimorfizmem była transwersja C-to-A w nieulegającym translacji regionie 3 w eksonie 5, 43 zasad poniżej ostatniego nukleotydu kodonu stop. Stwierdzono heterozygotyczność obecną u 9 z 28 badanych przez nas pacjentów. Uważamy, że ta zmienność sekwencji prawdopodobnie nie będzie miała efektu fenotypowego, ze względu na jej pozycję w regionie 3 nieulegającym translacji i ponieważ zauważyliśmy to również u jednego normalnego osobnika, który służył jako kontrola do sekwencjonowania.
Pochodzenie mutacji Pro-23-His i Pro-347-Leu
Oceniliśmy naszych pacjentów i pacjentów zdrowych pod względem alleli zdeterminowanych polimorfizmem powtórzenia dinukleotydu (CA) w obrębie intronu genu rodopsyny8. Określiliśmy również allele obecne przy polimorfizmie RsaI w intronie 3. Wszystkie 17 niepowiązanych pacjentów z C-do – Transwersja w obrębie kodonu 23, którą opisaliśmy wcześniej (Pro-23-His) 6 niosła ten sam allel (allel 4) polimorfizmu powtórzenia dinukleotydowego; porównuje się to z oczekiwaną częstotliwością 3,41, na podstawie badań normalnych podmiotów (chi-kwadrat = 98,9, P <0,001) [patrz też: pulmicort inhalacje, sluz w kale, relanium ulotka ]